অতিস্বনক homogenizer Escherichia coli বিরতি যখন সাধারণ সমস্যা

ই। কোলি বিদেশী প্রোটিন প্রকাশ। Sonicated যখন, এটা পিবিএস 1% Triton-X-100 ধারণকারী স্থগিত করা হয়। অতিস্বনক প্রভাব ভাল। 1% Triton-X-100 এর প্রভাব এখনও সুস্পষ্ট। Streptomyces হিসাবে কাজ করে।

ব্যাকটেরিয়াল বৃষ্টিপাত সরাসরি নমুনা 1 বাফার যুক্ত করুন, ম্যারক্যাপটোথেননলের 5 মিলিমিটার যোগ করুন, মেশান, সেন্ট্রিফিউজ, 10 মিনিটের জন্য ফুটন্ত, সরাসরি লোড, স্টেইনং এবং ডিকোলারিং পদক্ষেপগুলি নিম্নরূপ: নিম্নরূপঃ 1 মিটারের জন্য মাইক্রোওয়েভ ওভেনে সঠিক পরিমাণে রঞ্জনবিদ্যা তরল মধ্যে আঠা রাখুন। সমাধান একটি বড় পরিমাণ দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয় 10 মিনিটের জন্য পানি মাইক্রোওয়েভ রান্না করা যাবে।

Recombinant প্রোটিন প্রকাশ করার পরে, কক্ষগুলি অতিস্বনক তরঙ্গ দ্বারা বরখাস্ত হয়, একটি বরফ স্নান, 400W, এবং 2S ব্যবহার করে 1S জন্য বন্ধ, কিন্তু অল্প সময়ের মধ্যে একটি বড় পরিমাণে ফেনা উত্পন্ন হয়, যা নিষ্পেষণ দক্ষতা প্রভাবিত। উভয় pbs এবং tris বাফার একই ছিল, এবং অবশেষে নিষ্পেষণ অসম্পূর্ণ ছিল। কিন্তু আমার লক্ষ্য প্রোটিন এই অবিচ্ছেদ্য কোষে, যা আমাকে পরীক্ষামূলক ফলাফল পেতে অক্ষম করে তোলে।

আমি আপনাকে এই পরিস্থিতির এবং সমাধান কেন একটি বিশ্লেষণ দিতে।

1. বুদবুদগুলি তৈরি করা হবে কারণ আপনার প্রোব অবস্থানটি ভালভাবে স্থাপন করা হয় না, প্রোবটি নিচের দিকে থাকতে হবে, প্রায় 1 সেন্টিমিটার (আমি সাধারণত 0.5 সেমি থেকে নীচে), যন্ত্রটিতে বিভিন্ন পাওয়ার স্তর থাকবে তবে আপনি এটি পর্যবেক্ষণ করতে পারেন পাতা, উষ্ণতা আছে কিন্তু খুব আক্রমনাত্মক হতে হবে না।

2. সুপার 3 এস 10S বন্ধ, প্রভাব দেখতে প্রায় 20 বার আল্ট্রাসাউন্ড

3. শিং অবস্থান মনোযোগ দিতে। আপনি সঠিক না হলে, আপনি সময়মত এটি সামঞ্জস্য করা উচিত। উপরন্তু, ব্যাকটেরিয়া ঘনত্বের দৃষ্টিকোণ থেকে, ক্রাশ করার সময় ভলিউম বাড়াতে চেষ্টা করুন, শক্তি 60% অতিক্রম করা উচিত নয়।

সুপার 8 এস জন্য 8S চেষ্টা করুন। কিছু ব্যাকটেরিয়া প্রোটিনগুলির জন্য, আপনার পদ্ধতিটি তাপ অপচয় করা কঠিন, যার ফলে প্রোটিন ডিনাটাইগ্রেশন এবং বুদ্বুদ প্রজন্মের সৃষ্টি হয়। এটি একটু দীর্ঘ জন্য বিরতি। এই অন্তর্ভুক্তি সংস্থা আকারে আরো সাধারণ।